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Kolorimetrisdie Bestimmnng des Blnt pH
Die Farbe, die eine Phenolrotlösung im Plasma gibt, wird verglichen mit der optischen Mischung zweier Röhrchen, die Phenolrot in alkalischer und saurer Lösung enthalten, und einem bestimmten pH entspricht. Zum Ausgleich der Eigenfärbung des Plasmas wird Plasma als Kontrolle in die optische Mischung eingeschaltet (vergl. Abb. 4, S. 39).
Geräte:
1 Pipette 0,2 ml 1 Meßpipette 1,0 ml 1 Meßpipette 10,0 ml 1 Glasstab mit Fuß 5. Reagenzgläser 0 1,0 cm
Material:
Plasma (steht unter Paraffinöl aus) Phenolrotlösung (0,01 g/lOO ml) Kochsalzlösung (0,9 g/100 ml) Paraffinöl
Mit einer heparinisierten Spritze werden einige ml Blut entnommen, unter eine etwa 0,5 cm dicke Parafflnölschicht in ein Zentrifugenglas gegeben und zentrifugiert (lO'/lOOO g).
Im Praktikum steht Plasma unter Paraffinöl aus.
Gib in ein Reagenzglas mit einer Meßpipette 4,3 ml NaCl-Lösung (0,9 g/100 ml) und 0,5 ml Phenolrotlösung (0,1 g/100 ml) und überschichte die Mischung mit Paraffinöl (Schichtdicke 0,5 cm).
Dann entnimm mit der Pipette genau 0,2 ml Plasma (Pipette abwischen!), gib sie in das vorbereitete Reagenzglas unter die Parafflnölschicht und misch mit einem Glasstab mit Fuß gut, aber vorsichtig, unterhalb des Paraffinöls durch.
In zwei weitere Reagenzgläser gibt man je 4,8 ml NaCl-Lösung (0,9 g/100 ml) und ebenfalls 0,2 ml Plasma (Kontrollröhrchen). Es ist auf gute Mischung zu achten! Man vergleicht nun mit den ausstehenden Standardkombinationen in einem Bereich, in dem man das pH des Plasmas vermutet, im Komperator.
Die Röhrchen werden wie in Abb. 4, S. 39, angeordnet.